化妝品抗衰老功效評(píng)價(jià)方法:體外評(píng)價(jià)方法和人體評(píng)價(jià)方法分析

227次 2024.09.29

    化妝品皮膚衰老可以通過(guò)抗氧化、抗糖化、抗細(xì)胞外基質(zhì)降解、抗羰基化等不同機(jī)理和方向出發(fā)。目前常用的抗衰化妝品功效評(píng)價(jià)方法有生化法、細(xì)胞法、3D皮膚模型法、離體皮膚方法以及人體法。





    中科檢測(cè)是專業(yè)的化妝品安全檢測(cè)中心,經(jīng)國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門確認(rèn)可承擔(dān)化妝品注冊(cè)和備案檢驗(yàn)等工作,可提供化妝品功效評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全檢測(cè)等化妝品安全相關(guān)服務(wù)。


    體外評(píng)價(jià)方法


    抗氧化實(shí)驗(yàn)


    自由基是人體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種垃圾毒素,皮膚的衰老與自由基有關(guān),抑制自由基的產(chǎn)生從一定程度上可抑制細(xì)胞的衰老??寡趸瘜?shí)驗(yàn)一般測(cè)試產(chǎn)品吸光度,判斷活性氧和自由基的含量,評(píng)價(jià)產(chǎn)品清除自由基或活性氧的效果。


    炎癥因子、炎癥介質(zhì)抑制實(shí)驗(yàn)


    紫外線、生物和化學(xué)因素均可誘導(dǎo)產(chǎn)生炎癥因子或炎癥介質(zhì),導(dǎo)致蛋白質(zhì)、脂質(zhì)與糖類發(fā)生非酶糖基化反應(yīng),生成脂褐素等無(wú)法代謝的產(chǎn)物,同時(shí)可刺激黑色素細(xì)胞產(chǎn)生黑色素,引起色素的沉積,存留于皮膚中,引發(fā)老年斑??赏ㄟ^(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、蛋白質(zhì)免疫印跡等方法測(cè)試產(chǎn)品對(duì)炎癥因子、炎癥介質(zhì)的抑制效果,評(píng)價(jià)其延緩皮膚衰老功效。


    基質(zhì)金屬蛋白酶-1活性(MMP-1)抑制實(shí)驗(yàn)


    MMP-1又稱膠原酶-1,是導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)皺縮、細(xì)紋等衰老癥狀的最主要的酶。采用分光光度法檢測(cè)產(chǎn)品對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶活性的抑制情況,可以評(píng)價(jià)其抗衰老功效。


    細(xì)胞表達(dá)膠原蛋白實(shí)驗(yàn)


    皮膚中膠原蛋白的流失,會(huì)造成皮膚松弛、彈性下降、細(xì)紋增多且不斷加深,呈現(xiàn)衰老跡象。人體皮膚中的膠原蛋白主要為Ⅰ型和Ⅲ型。其中,Ⅰ型膠原蛋白約占70%,Ⅲ型膠原蛋白占30%。皮膚出現(xiàn)老化時(shí),膠原蛋白含量逐漸降低,兩者比例發(fā)生倒置,同時(shí)膠原變粗,出現(xiàn)異常交聯(lián)??刹捎妹庖呒?xì)胞化學(xué)法等方法,對(duì)引起Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白及其他相關(guān)蛋白、基因、酶改變的標(biāo)記物進(jìn)行測(cè)試,評(píng)價(jià)產(chǎn)品抗衰老功效。


    線粒體膜電位實(shí)驗(yàn)


    線粒體膜電位的變化與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。通過(guò)測(cè)試線粒體膜電位的提升情況,可以評(píng)價(jià)皮膚的衰老狀況,間接評(píng)價(jià)產(chǎn)品的抗衰老功效。


    細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)


    皮膚的細(xì)胞凋亡是正常的生理現(xiàn)象,隨著年齡的增長(zhǎng),真皮中的成纖維細(xì)胞會(huì)逐漸凋亡。此外,UVA照射會(huì)引起細(xì)胞損傷,造成皮膚光老化。通過(guò)紫外光照射體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,同時(shí)加入抗氧化物質(zhì),用顯微鏡觀察細(xì)胞是否出現(xiàn)解體、排列紊亂、脫顆粒等現(xiàn)象,可分析細(xì)胞的凋亡率。此外,還可結(jié)合抗炎測(cè)試,綜合評(píng)價(jià)抗氧化物質(zhì)對(duì)抑制細(xì)胞凋亡的作用,反映產(chǎn)品的抗衰老功效。


    人體評(píng)價(jià)方法


    抗皺測(cè)試


    臉部不同部位的皺紋出現(xiàn)時(shí)間不同,其中眼角的皺紋出現(xiàn)最早,是評(píng)估皮膚老化的關(guān)鍵點(diǎn)。目前,評(píng)價(jià)皺紋較精準(zhǔn)的儀器包括皮膚光學(xué)快速成像系統(tǒng)、皮膚快速三維成像系統(tǒng),采用基于條紋投影測(cè)量技術(shù)的3D測(cè)量方法,快速獲得皮膚表面形態(tài)信息,并轉(zhuǎn)化為三維圖像,從而獲得皮膚皺紋、皮膚粗糙度的指標(biāo)數(shù)據(jù)。此外,還可采用圖像成像系統(tǒng)獲取面部圖像,然后用圖像分析軟件提取眼角區(qū)域的皺紋,分析皺紋的長(zhǎng)度、深度和面積等。


    皮膚緊致測(cè)試


    彈性纖維被破壞、皮膚彈性減弱,會(huì)導(dǎo)致皮膚緊致度下降,出現(xiàn)皮膚下垂。因此,可根據(jù)皮膚彈性和下垂度變化評(píng)價(jià)產(chǎn)品的緊致功效。皮膚下垂度主要通過(guò)對(duì)面部正面和仰臥位的主觀評(píng)估判斷。


    皮膚彈性測(cè)試


    皮膚彈性是衡量皮膚衰老程度的重要指標(biāo)。皮膚彈性主要由皮膚膠原纖維、彈力纖維的數(shù)量和排列關(guān)系決定。隨著年齡的增加,皮膚中可溶性膠原纖維減少,不溶性膠原纖維增加,皮膚的伸展度隨之減少,皮膚彈性降低。使用特定儀器測(cè)試皮膚彈性,可以評(píng)價(jià)產(chǎn)品延緩衰老的功效。


    皮膚水分含量測(cè)試


    真皮層水分含量流失,會(huì)導(dǎo)致角質(zhì)層因?yàn)槿彼a(chǎn)生細(xì)紋。健康皮膚角質(zhì)層的含水量為10%~30%,角質(zhì)層含水量低于10%時(shí),皮膚就會(huì)變得干燥、粗糙,容易產(chǎn)生細(xì)紋。測(cè)試使用產(chǎn)品前后皮膚水分含量的變化,可間接評(píng)價(jià)產(chǎn)品抗衰老功效。現(xiàn)在常用的測(cè)試皮膚水分含量的儀器有共聚焦拉曼光譜儀等。


    皮膚顏色測(cè)試


    皮膚老化后,膚色會(huì)泛黃發(fā)暗,出現(xiàn)老年斑。紫外線的照射會(huì)促使黑色素細(xì)胞分泌黑色素,在自由基和炎癥反應(yīng)的作用下產(chǎn)生曬斑,呈現(xiàn)色素沉著。同時(shí),還原性糖與蛋白質(zhì)的結(jié)合物高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物(AGEs),為棕色或黑色的大分子物質(zhì),出現(xiàn)在真皮和表皮。隨著年齡的增長(zhǎng),人體皮膚會(huì)出現(xiàn)AGEs沉積,導(dǎo)致皮膚發(fā)黃,產(chǎn)生褐斑、老年斑。因此,評(píng)估皮膚顏色的變化,可以間接評(píng)價(jià)產(chǎn)品的抗衰老功效。


    皮膚微循環(huán)測(cè)試


    皮膚微循環(huán)系統(tǒng)是個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng),也是皮膚的重要結(jié)構(gòu)。作為皮膚屏障的重要組成部分,皮膚微循環(huán)系統(tǒng)起著儲(chǔ)存血液和營(yíng)養(yǎng)皮膚的重要作用。皮膚血流量是評(píng)價(jià)皮膚微循環(huán)情況的重要標(biāo)準(zhǔn)。研究表明,年輕人皮膚血管排列整齊,年齡較大者血管擴(kuò)張、扭曲、排列不規(guī)則??傮w上,隨著年齡的增長(zhǎng),皮膚血流量增加,但由于皮膚微循環(huán)還受其他因素影響,所以在評(píng)價(jià)化妝品原料或產(chǎn)品的抗衰老功效時(shí),一般只作為輔助指標(biāo)。常用的測(cè)試儀器為激光多普勒成像儀。該儀器利用激光多普勒原理,檢測(cè)人體組織微循環(huán)。


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